色综合激情_国产欧美日韩综合精品一区二区_久久中文字幕一区_国产精品无码永久免费888_wwwxxx日本_一区在线播放

服務咨詢熱線:

021-66030766

TECHNICAL ARTICLES

技術文章

當前位置:首頁技術文章基因組DNA提取純化的注意事項

基因組DNA提取純化的注意事項

更新時間:2015-07-01點擊次數:1419


  1. 組織樣本 DNA 純化

大多數動物組織可以用裂解緩沖液和蛋白酶/蛋白酶 K 進行裂解。在加入裂解液之前需要將組織切成小塊,有條件的話建議使用 TissueLyser 或研缽等提前進行均質化。骨骼肌,心臟,皮膚等組織含有收縮蛋白,結締組織和膠原蛋白,所以利用蛋白酶 / 蛋白酶 K 進行充分消化是必須的。

FFPE 樣本進行 DNA 純化時需要預裂解。福爾馬林可由 PBS 洗滌除去,石蠟可由二甲苯和乙醇進行去除。在蛋白酶消化后提高孵育的溫度有助于逆轉交聯,以便更好的從 FFPE 組織中釋放 DNA,從而有助于提高 DNA 產量和改善下游檢測性能。 從 FFPE 中得到的 DNA 通常比從新鮮或凍存樣本中得到的 DNA 分子量小;DNA 降解的程度則取決于樣本類型,儲存時間和固定的條件。


  1. 從微量樣本中純化 DNA

微量樣本中 DNA 的含量很低,通常小于 5 ng DNA, 通常需要使用 carrier RNA 來提高產量(不會影響下游分析檢測)。如果需要使用 carrier RNA,那么在測量 OD 的時候會因為使用 carrier RNA 造成濃度測量有偏差(因為 RNA 在 260 nm 也有吸收)。

推薦使用 QIAamp DNA Micro Kit 從微量樣本中進行 DNA 純化,該試劑盒采用 MinElute 硅膠膜柱,洗脫體積可以低至 20 μl,同時通過兩步洗滌去除 PCR 抑制劑等污染物,zui大程度從微量樣本中純化 DNA。


  1. 從血液樣本中純化 DNA

血液樣本可以是新鮮或凍存全血或干血片,由于血液樣本在采集后會迅速凝固,所以通常在采血時使用 EDTA,檸檬酸鹽或肝素進行抗凝。經過抗凝處理的血液樣本可以直接用于 DNA 純化,需要注意的是使用的 DNA 純化方法需要能夠去除上述抗凝劑,以免干擾下游 PCR 檢測。全血也可以在 DNA 純化前*行白細胞富集等再進行 DNA 純化。

從血液中純化 DNA 的產量很大程度上取決于血液中的白細胞數量,而白細胞數量則和血液的供體情況有很大關聯(如貧血或感染都會造成白細胞數量變化)。上述情況必須在進行 DNA 純化前就應該考慮到。此外,有些動物有有核血,這意味著這類樣本中含有更多的 DNA,在從此類血樣中純化 DNA,上樣量需要減少 10 倍左右。


從細胞中純化 DNA
  1. 哺乳動物細胞可以使用蛋白酶 K 進行裂解
  2. 酵母細胞需要首先使用溶菌酶對細胞壁進行處理,然后使用蛋白酶或蛋白酶 K 進行消化
  3. 許多細菌細胞可以使用裂解 buffer 和蛋白酶 / 蛋白酶 K 進行裂解,某些細菌如革蘭氏陽性菌需要預先使用溶菌酶對細胞壁進行處理
  4. 細菌細胞需要先從生物體液中沉淀,然后從中純化細菌 DNA,拭子樣本需要先使用殺菌劑進行預處理然后再離心
  5. 使用機械裂解會比用酶消化的效果要好,尤其是針對革蘭氏陽性菌或真菌而言

尊敬的客戶:
    感謝您關注我們的產品,本公司除了有此產品介紹以外,還有三用紫外分析,核酸蛋白檢測儀,凝膠成像分析系統,光化學反應儀,恒流泵,自動部分收集器等等的介紹,您如果對我們的產品有興趣,咨詢。謝謝!

上海嘉鵬科技有限公司 www.shjpkj。。com / www.jp1718。。com
:   36162366 
400免費:4000-123-925  
 
,,,,2880150297

地址:上海市真陳路1398弄15號  :200444 


上一個:你知道蠕動泵種類有那兩種?

返回列表

下一個:RNA提取純化的注意事項

主站蜘蛛池模板: 天天天天操 | 免费观看成人鲁鲁鲁鲁鲁视频 | 99国产精品99久久久久久粉嫩 | 午夜成人免费视频 | 久久精品国产一区二区电影 | 欧美黑人一区二区三区 | 在线国产一区二区三区 | 一二三四在线视频观看社区 | 成人在线电影网站 | 国产亚洲精品精品国产亚洲综合 | 欧美日韩精品专区 | 一区久久 | 日韩91在线| 成人免费观看视频 | 精品国产精品三级精品av网址 | 日韩欧美视频网站 | 伊人无码高清 | 四虎影院新网址 | 久久久婷| 日韩国产中文字幕 | 国产日韩久久久久69影院 | www久| 亚洲国产小视频 | 日本天堂一区 | 久久精品一区二区三区四区 | 欧美精品99 | 岛国av在线免费观看 | 亚洲精品九九 | 国产一级电影在线 | 亚洲精品无 | 国产一级片一区二区三区 | www.婷婷| 夜夜久久 | 日本一卡精品视频免费 | 一级aaaaaa毛片免费同男同女 | 羞羞视频在线观看 | 亚洲第一福利网 | 国产精品久久久久久久免费大片 | 久久大陆 | 国产一区二区在线免费观看 | 最新中文字幕久久 |